【LB培养基】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛用于微生物学研究的通用液体培养基,尤其在大肠杆菌(Escherichia coli)的培养中应用最为普遍。它由三部分组成:胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,为细菌提供丰富的营养物质,支持其快速生长和繁殖。
一、LB培养基的主要成分及作用
成分 | 含量(g/L) | 作用说明 |
胰蛋白胨 | 10 g | 提供氮源和氨基酸,促进菌体生长 |
酵母提取物 | 5 g | 补充维生素、矿物质和生长因子 |
氯化钠 | 10 g | 维持渗透压平衡,模拟生理环境 |
琼脂(固体培养基) | 15–20 g | 固定培养基形态,便于菌落观察 |
二、LB培养基的制备方法
1. 称量:按照上述比例称取各成分。
2. 溶解:将所有成分加入蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 灭菌:将溶液装入烧瓶中,于121°C高压灭菌15分钟。
4. 冷却与分装:冷却至约50°C后,倒入无菌培养皿或试管中,待其凝固后使用。
三、LB培养基的应用
- 常规菌株培养:适用于大多数革兰氏阴性菌的增殖。
- 分子生物学实验:常用于质粒扩增、转化实验等。
- 菌落筛选:配合抗生素选择标记,用于筛选重组菌株。
四、LB培养基的优点与局限性
优点 | 局限性 |
成本低,配制简单 | 营养成分不够精确 |
适合多种细菌生长 | 不适合特殊营养需求的菌种 |
培养效果稳定,重复性强 | 无法满足某些实验要求 |
五、常见变体与改进型
为了适应不同实验需求,研究人员对LB培养基进行了多种改良:
- LB液体培养基:不加琼脂,用于菌液培养。
- LB琼脂培养基:添加琼脂,用于平板培养。
- 补充型LB培养基:如添加葡萄糖、甘油等碳源,或抗生素、金属离子等。
综上所述,LB培养基因其配方简单、适用范围广、成本低廉而成为实验室中不可或缺的基础培养基之一。尽管它在某些方面存在局限性,但在多数常规实验中仍具有重要价值。